如何解決細(xì)胞培養(yǎng)瓶細(xì)胞成團(tuán)問題有哪幾種方式

　　細(xì)胞培養(yǎng)瓶主要用于簡化大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的過程，培養(yǎng)瓶的設(shè)計(jì)能夠簡化您的工作流程，減少工作步驟以及降低污染風(fēng)險(xiǎn)。可以使用移液管移去、補(bǔ)充培養(yǎng)基并且收獲細(xì)胞，設(shè)計(jì)有混合區(qū)可實(shí)現(xiàn)在容器內(nèi)的液體混合，因此可以將細(xì)胞懸液、轉(zhuǎn)染或者其他試劑直接加入到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行混合。同時(shí)，混合區(qū)可確保培養(yǎng)基和細(xì)胞在各層的均勻分布，從而保證細(xì)胞生長的均勻一致。
 

　　細(xì)胞培養(yǎng)瓶中平均分布的培養(yǎng)基、Nunclon表面處理技術(shù)和有效的氣體交換共同為細(xì)胞提供了一個(gè)最佳的培養(yǎng)環(huán)境，從而為細(xì)胞的高產(chǎn)量和細(xì)胞同源性提供保障。在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞成活率和活性都有顯著提高。培養(yǎng)瓶裝液體積比例提高，單位體積表達(dá)量的增加?？梢源罅抗?jié)省培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)基的消耗，具有高重復(fù)性，不同批可擴(kuò)展性次細(xì)胞生長以及產(chǎn)量具有很高的一致性。
 

　　首先，細(xì)胞成團(tuán)并不一定都會影響細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程。如果細(xì)胞輪廓清晰胞體通透，呈串狀均勻聚集，證明細(xì)胞的生長狀態(tài)良好。但多數(shù)情況下，聚團(tuán)的細(xì)胞都是輪廓模糊、透光性差，甚至?xí)霈F(xiàn)合胞體，伴有細(xì)胞碎片，這證明細(xì)胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變，狀態(tài)不佳。解決細(xì)胞成團(tuán)問題可以通過以下幾種方式：
 

　　1、如果細(xì)胞抱團(tuán)不影響生長就沒問題，只是計(jì)數(shù)時(shí)較麻煩。在消化時(shí)，可在細(xì)胞由多角形變成圓型之前，用手輕磕細(xì)胞培養(yǎng)瓶的側(cè)壁，使細(xì)胞從壁上脫落(最好不要吹打，對細(xì)胞形狀和生長都不好)。
 

　　2、如果感覺有死細(xì)胞的DNA，在細(xì)胞懸液中加入幾滴無菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細(xì)胞，防止對細(xì)胞膜造成物理損傷。
 

　　3、如果細(xì)胞抱團(tuán)是肉眼可見的，可讓細(xì)胞靜置半分鐘左右，然后吸取上半部分沒有抱團(tuán)的細(xì)胞懸液來傳代。如果細(xì)胞抱團(tuán)肉眼不可見，目前還沒有特別好的分離方法，只能等細(xì)胞狀態(tài)改善后將這部分細(xì)胞慢慢排除出去。
 

　　細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)抱團(tuán)現(xiàn)象，可以按照以上方法進(jìn)行處理，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要及時(shí)觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，并針對所出現(xiàn)的情況做出相應(yīng)的調(diào)整。